Molecular Probes™ pHrodo™ Red and Green AM Intracellular pH Indicator Dyes

Description

Mesurez et quantifiez le pH intracellulaire avec les colorants indicateurs de pHrodo Red et Green AM, qui sont des sondes fluorogéniques qui traversent la membrane cellulaire et restent dans l’espace intracellulaire lors du clivage par des estérases non spécifiques. Les colorants indicateurs pHrodo Red et Green AM deviennent de plus en plus fluorescents lorsque le pH diminue et peuvent être utilisés pour quantifier le pH cytosolique dans la plage comprise entre 4 et 9. Ces colorants indicateurs peuvent également être utilisés dans des expériences de multiplexage au sein des applications de HCS, cytométrie en flux, fluorométrie sur microplaques et HCS.

Les indicateurs de pH intracellulaire pHrodo Red (n° de cat. P35372) et Green (n° de cat. P35373) AM sont des sondes fluorogéniques utilisées pour mesurer le pH intracellulaire dans les cellules vivantes. Ils sont faiblement fluorescents à un pH neutre, mais de plus en plus fluorescents lorsque le pH diminue. Ces réactifs peuvent être utilisés pour quantifier le pH cytosolique cellulaire dans une plage comprise entre 4 et 9 avec un pKa de ∼6,5 et avec des spectres d’excitation/émission de 560/585 nm (pHrodo Red) ou de 509/533 nm (pHrodo Green).

Les colorants indicateurs de pH pHrodo Red et pHrodo Green sont photostables et adaptés à une utilisation dans les expériences de multiplexage. Le pHrodo Red est facilement multiplexable avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, verts et rouge profond tels que GFP, Fuo-4, calcéine, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 green, Mitosox Green et Mitotracker Deep Red, entre autres. Le pHrodo Green est facilement multiplexable avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, rouges et rouge profond, tels que Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP et Mitotracker Deep Red, entre autres.

La modification des colorants pHrodo Red et Green par des groupes d’ester AM se solde par une molécule non chargée qui peut pénétrer dans les membranes cellulaires. Une fois à l’intérieur de la cellule, les groupes bloquants lipophiles des colorants sont clivés par des estérases non spécifiques, ce qui entraîne des composés qui sont retenus dans l’espace intracellulaire. L’intensité de fluorescence de la sonde devient donc un indicateur du pH intracellulaire. L’utilisation ultérieure du kit de tampon d’étalonnage du pH intracellulaire (Réf. P35379) permet de quantifier ce pH intracellulaire.

Les colorants indicateurs de pH intracellulaire pHrodo Red et Green AM sont compatibles avec diverses plateformes, telles que la microscopie par fluorescence traditionnelle, l’analyse à haute densité (HCS), la cytométrie en flux et la fluorimétrie basée sur microplaques ou le criblage à haut débit (HTS). Ces réactifs sont également compatibles avec la microscopie par fluorescence grand champ ou confocale, la cytométrie en flux, les lecteurs de plaques de fluorescence et les instruments à haute densité.