Thermo Scientific™ Nucléase S1 (100 U/μl)

Description

La nucléase S1 dégrade les acides nucléiques simple brin en libérant des mononucléotides ou des oligonucléotides 5’-phosphoryles. Elle est cinq fois plus active sur l’ADN que sur l’ARN. La nucléase S1 clive également l’ADN double brin au niveau de régions simples brins provoquées par une entaille, un mésappariement ou une boucle. La nucléase S1 présente une activité de 3’-phosphomonoestérase.

L’enzyme est une glycoprotéine contenant 18 % de carbohydrates.

• Source : Aspergillus oryzae
• Poids moléculaire : Monomère 29 kDa

• L’absence d’activité de nucléase spécifique à l’ADN double brin contaminant confirmée par un test de qualité approprié
• Testé de manière fonctionnelle pour la génération de délétions unidirectionnelles dans des fragments d’ADN (en conjonction avec l’exonucléase III)

• Aspergillus oryzae

• Monomère 29 kDa

• Une unité d’enzyme produit 1 μg de déoxyribonucléotides soluble dans l’acide en 1 min à 37°C.
• L’activité enzymatique est dosée dans le mélange suivant : Acétate de sodium 30 mM (pH 4,5), NaCl 50 mM, ZnCl₂ 0,1 mM, glycérol 5 % (v/v), ADN de thymus de veau dénaturé par chaleur 800 μg/ml

• L’enzyme est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 20 mM (pH 7,5), NaCl 50 mM, ZnCl₂ 0,1 mM et glycérol 50 % (v/v)

• Acétate de sodium 200 mM (pH 4,5 à 25°C), NaCl 1,5 M et ZnSO₄ 10 mM

• Inhibiteurs : chélateurs métalliques, PP_i, P_i, 5’-ribonucléotides et désoxyribonucléotides
• Inactivation par chauffage à 70°C pendant 10 min en présence d’EDTA

Recommandé dans les cas suivants :

Élimination de saillies simple brin de fragments d’ADN (2) ; cartographie des transcripts S1 (3, 4) ; clivage des boucles en épingle à cheveux ; création de délétions unidirectionnelles des fragments d’ADN en conjonction avec l’exonucléase III (5)

Remarque :

La nucléase S1 peut provoquer des cassures de l’ADN double brin, de l’ARN double brin et des hybrides ADN/ARN en cas de concentration élevée d’enzymes et de faible concentration en sel (6).