Molecular Probes™ Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit, for flow cytometry

Description

Le kit d’apoptose de cellules mortes / la sonde d’asymétrie membranaire ratiométrique violette offre une méthode simple et rapide pour détecter l’apoptose avec discrimination des cellules mortes par cytométrie en flux. La sonde d’asymétrie membranaire ratiométrique violette, 4’-N,N-diéthylamino-6-(N,N,N-dodécyl-méthylamino-sulfopropyl)-méthyl-3-hydroxyflavone (F2N12S), est un nouveau colorant excité par le violet qui détecte les changements d’asymétrie membranaire pendant l’apoptose. Le colorant présente une réaction de transfert de protons intramoléculaire à l’état excité (ESIPT) qui provoque une double fluorescence avec deux bandes d’émission correspondant à 530 nm et 585 nm, produisant une réponse ratiométrique à deux couleurs aux variations de charge de surface. Les sondes ratiométriques présentent plusieurs avantages par rapport aux réactifs marqués au fluorochrome traditionnels. La sonde ratiométrique est un paramètre absolu à étalonnage automatique de la transformation apoptotique, indépendant de la concentration de la sonde, de la taille des cellules et de la variation de l’instrument, comme les fluctuations d’intensité du laser ou de sensibilité des détecteurs. Étant donné que l’apoptose modifie la charge de surface du feuillet externe de la membrane plasmique, la sonde d’asymétrie à membrane violette F2N12S peut surveiller les changements d’asymétrie de la membrane qui se produisent pendant l’apoptose par un changement d’intensité relative des deux bandes d’émission du colorant. La sonde F2N12S est associée à la coloration des cellules mortes SYTOX(R) AADvanced, qui peut traverser la membrane cellulaire uniquement dans les cellules apoptotiques ou nécrotiques tardives, ce qui permet de les distinguer des cellules apoptotiques précoces. Les échantillons peuvent être analysés après une incubation de 5 minutes à température ambiante et ne nécessitent pas de tampons spéciaux ou d’étapes de lavage. Ce kit peut être associé à d’autres réactifs tels que MitoProbe™ DiIC1(5) ou annexine V pour l’analyse multiparamètre de l’apoptose et de la viabilité. Ce kit de réactifs permet aux chercheurs de maximiser l’utilité de leurs instruments en utilisant le laser violet. Chaque kit contient suffisamment de réactifs pour ∼ 100 tests de cytométrie en flux.

Consultez un guide de sélection de tous les dosages d’apoptose pour la cytométrie en flux.