Thermo Scientific™ Immobilized Ficin (Agarose Resin)

Description

La ficine immobilisée Thermo Scientific™ Pierce est constituée d’une protéase spécifique au sulfhydryle (ficine) immobilisée sur des microbilles de résine d’agarose pour permettre une fragmentation contrôlée des anticorps, en particulier de l’IgG1 de souris.

La ficine, semblable à la papaïne, est une protéase sulfhydryle non spécifique isolée du latex de figue. Le poids moléculaire de la ficine est d’environ 25 000 et il est efficace à un pH de 4 à 9,5 avec un pH optimal de 6,5. Lorsque des molécules d’IgG sont incubées avec de la ficine en présence de cystéine, une ou plusieurs liaisons peptidiques dans la région de la charnière sont divisées, produisant soit des fragments Fab, soit des fragments F(ab’)2. L’IgG1 de souris est particulièrement difficile à digérer en fragments Fab ou F(ab’)2 fonctionnels à l’aide de papaïne ou de pepsine, mais les rendements et l’immunoréactivité sont meilleurs lors de la digestion de l’IgG1 de souris avec de la ficine. La ficine immobilisée a été spécifiquement conçue pour le clivage de l’IgG1 de souris ou des fragments Fab ou F(ab’)2 et est avantageuse, car elle élimine presque l’autolyse, élimine la contamination d’un échantillon avec la protéase et permet de contrôler la digestion en éliminant la ficine ou en contrôlant le flux de l’échantillon sur une colonne de ficine immobilisée.

Points clés :

• Peut générer des fragments Fab et F(ab’)2 à partir d’IgG1 de souris
• La réaction peut être facilement contrôlée
• Les fragments d’anticorps sont exempts de produits d’autodigestion
• La contamination fictive dans les fragments d’anticorps est éliminée