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Invitrogen™ RiboPure™ RNA Purification Kit
Prétraitement enzymatique non requis
Marque: Invitrogen™ AM1924
Description
Le kit Ambion RiboPure est conçu pour la purification rapide d’ARN de haute qualité à partir d’échantillons de tissus ou de cellules de culture. Le kit associe le TRI Reagent™ à la purification par filtre en fibre de verre pour obtenir un ARN d’une pureté exceptionnelle, sans protéines et lipides résiduels. Le kit contient suffisamment de réactifs pour 50 purifications de 1 à 100 mg de tissu ou de 0,1 à 20 x 106 de cellules de culture chacun.
L’ARN isolé à l’aide du kit RiboPure convient à toutes les applications courantes en aval, y compris la synthèse de l’ADNc, la RT-PCR en temps réel et en point final, l’analyse microarray, les transferts Northern et les dosages de protection de l’ARNase. Le protocole RiboPure est particulièrement adapté au traitement d’échantillons difficiles à perturber ou d’échantillons contenant de grandes quantités de ribonucléase ou d’autres contaminants. Les échantillons sont d’abord homogénéisés dans le réactif TRI, une solution monophasique contenant du phénol et du thiocyanate de guanidine, pour lyser rapidement les cellules et inactiver les nucléases. L’addition de bromochloropropane (BCP) entraîne la séparation de l’homogénat en phases aqueuses et organiques. L’ARN se divise en phase aqueuse, tandis que l’ADN et les protéines restent en phase interphase et organique. La phase aqueuse est éliminée et s’écoule par un filtre en fibre de verre qui lie l’ARN. Le filtre est nettoyé et l’ARN élué. La procédure est compatible avec les tissus qui ont été conservés dans la solution RNAlater™ Ambion. Le rendement en ARN total est généralement de 100 à 500 μg par 100 mg de tissu, selon le type de tissu.
- Donne un ARN de la plus grande pureté possible
- Idéal pour les applications en aval les plus strictes
- Gère facilement les échantillons problématiques
- Procédure rapide (moins de 30 minutes) et simple
Non compatible avec des cadences élevées (manuel)
Applications :
Purification et analyse de l’ADN et de l’ARN, extraction de l’ARN, isolement total de l’ARN, ARN total des cellules et tissus animaux
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Température ambiante
Spécification
• 50 ml de réactif TRI ; conserver à 4°C • 50 cartouches filtrantes ; température ambiante • 100 tubes de prélèvement (2 ml) ; température ambiante • 60 ml de solution de lavage (concentrée) ; température ambiante • 11 ml de tampon d’élution ; température ambiante |
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30 min. (Après homogénéisation des échantillons) | |
Cellules, Tissus, tissus (mammifères) | |
Non compatible avec le haut débit (manuel) | |
50 Preps | |
Cellules : 0,1–20 x 106 Tissus : 5 à 100 mg |
Colonne de centrifugation (filtre en fibre de verre) | |
100 μlitres | |
ARN total | |
RT-PCR, qPCR, construction de bibliothèques d’ADNc, NGS, analyse microarray, hybridation de transfert, transfert Northern, traduction in vitro, dosages de protection de nucléases, marquage des acides nucléiques | |
Température ambiante | |
Jusqu’à 500 μg |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.