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Molecular Probes™ Colorant violet Vybrant™ DyeCycle™
Colorant violet Vybrant™ DyeCycle™
Marque: Molecular Probes™ V35003
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Description
Le colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ est un colorant d’ADN perméable aux cellules pouvant être utilisé pour l’analyse du cycle cellulaire et la population latérale des cellules souches par cytométrie de flux.Consultez un guide de sélection pour tous les produits liés à l’analyse du cycle cellulaire des cellules fixes et vivantes dans la cytométrie de flux.
Précis
La réussite d’une analyse du cycle cellulaire exige un colorant sélectif de l’ADN et peut colorer les cellules dans un modèle homogène qui réduit la variabilité de la fluorescence. Le colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ est un outil idéal pour l’analyse du contenu en ADN dans les cellules vivantes car la coloration est perméable aux cellules et, après la liaison de l’ADN bicaténaire, il émet un signal fluorescent proportionnel à la masse de l’ADN (voir la figure).
Cytotoxicité faible
Contrairement aux colorations nécessitant des concentrations élevées ou ayant des structures chimiques toxiques pour les cellules, les colorations Vybrant™ DyeCycle™ présentent une cytotoxicité relativement faible, ce qui permet de trier en fonction de la phase du cycle cellulaire.
Compensation minimale
Bien adapté à la ligne appréciée de laser violet, le complexe de ADN / colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ présente une émission de fluorescence et des maxima d’excitation de 369 / 437 nm, respectivement (voir la figure).
L’émission de laser violet et l’émission étroit de colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ le rendent propice pour le multiplexage en raison du chevauchement spectral limité avec d’autres colorants courants (Alexa Fluor™ 488, FITC et RPE) et des protéines fluorescentes (protéine verte fluorescente (GFP) et mCherry) . Le colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ peut également être utilisé avec une excitation UV, ayant une émission d’environ 440 nm.
Flexible
Le colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ a prouvé ses performances au niveau de cellules vivantes et fixes dans le cadre des dosages de cycle cellulaire, ainsi que ses capacités à identifier les populations latérales de cellules souches, ainsi que les cellules progénitrices précoces au sein de tissus hématopoïétiques de mammifères (voir la figure).
Protocole de coloration simple et robuste
Pour procéder à une analyse cellulaire, il vous suffit de préparer des tubes de cytométrie de flux contenant chacun 1 ml de cellules en suspension dans un milieu complet, à une concentration cellulaire de 1 ×106 cellules/ml. Ajoutez dans chaque tube 1 μl de colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ et mélangez bien. La concentration finale en colorant est de 5 μM. Incubez à 37°C pendant 30 minutes, à l’abri de la lumière. Conservez les cellules à une température de 37 °C jusqu’à l’acquisition. Analysez les échantillons sans les laver ni les fixer sur un cytomètre en flux, avec une excitation de 405 nm environ et une émission de 440 nm environ.
Spécification
| 5 mM | |
| Fluorescence | |
| Coloration | |
| 369 / 437 | |
| Tube(s) | |
| 200 réactions | |
| DMSO (diméthylsulfoxyde) |
| Contient 1 flacon de colorant violet Vybrant™ DyeCycle™ (5 mM dans du DMSO) Conserver au réfrigérateur (2°C à 8°C) et à l’abri de la lumière. | |
| Cytomètre en flux | |
| Violet Vybrant™ DyeCycle™ | |
| Solution | |
| DyeCycle™ | |
| Température ambiante | |
| Acides nucléiques |
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