Thermo Scientific™ Inhibiteur de la RNase RiboLock (40 U/μl)

Description

L’inhibiteur de RNase RiboLock inhibe l’activité des RNases A, B et C en les liant de façon non compétitive selon un rapport 1:1. Il n’inhibe pas les RNases eurokaryotes T1, T2, U1, U2, CL3 ni les RNases prokaryotes I et H.

• Elle n’inhibe pas les RNases eurokaryotes T1, T2, U1, U2, CL3 ni les RNases prokaryotes I et H
• Agit dans une multitude de conditions de réaction
• Protège l’ARN de la dégradation à des températures pouvant atteindre 55°C

• L’absence de ribonucléases, d’endodésoxyribonucléases, d’exodésoxyribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés
• Test fonctionnel dans la synthèse de l’ARN et de l’ADNc

• Cellules d’E.coli avec un gène cloné codant un inhibiteur de ribonucléase mammifère

• Monomère 49,6 kDa Définition de l’unité d’activité :
  • Une unité de l’inhibiteur de RNase RiboLock inhibe l’activité de 5 ng de RNase A de 50 %
  • L’activité inhibitrice est dosée dans le mélange suivant : Tris-HCl 100 mM (pH 7,5), EDTA 1,2 mM, BSA 0,1 mg/ml, RNase A 100 ng/ml, [³H]-ARN 0,1 mg/ml, ARN de levure 50 mg/ml, DTT 8 mM
  Tampon de stockage :
  • L’enzyme est fournie sous la forme suivante : HEPES-NaOH 20 mM (pH 7,5), NaCl 50 mM, DTT 8 mM, détergent ELUGENT 0,5 mM et glycérol 50 % (v/v)
  Inhibition et inactivation
  • Inhibiteurs : les dénaturants courants (SDS, urée et tous les réactifs oxydants (p-chloromercuribenzoate, oxygène dissous, ions à leurs états d’oxydation supérieurs) inhibent fortement l’inhibiteur de la RNase RiboLock et libèrent la RNase liée
  • Inactivée par chauffage à 75°C pendant 10 min. Activité résiduelle détectable après 10 min de chauffage à 70°C

  Recommandées dans les cas suivants :

  • Inhibition de la dégradation de l’ARN dans les domaines suivants : transcription in vitro (1), synthèse de l’ADNc (2), traduction in vitro (3), isolement de fractions cellulaires de mammifères qui contiennent un complexe ARNm-protéine
  • Purification et stockage de l’ARN
  • Séparation et identification d’activités spécifiques des ribonucléases
  • Études portant sur la suppression des tumeurs

  Remarque :

  • Le DTT contenu dans le tampon de stockage garantit la stabilité pendant le stockage à long terme, mais n’est pas nécessaire à l’activité de l’inhibiteur
  • La concentration recommandée est de 1 U/μl d’un mélange de réaction