Thermo Scientific™ Rapid Equilibrium Dialysis (RED) Inserts and Plates

Description

Les inserts et plaques de base Pierce du dispositif RED compétitif composent un système spécialement conçu pour évaluer les interactions de liaison compétitive via la technique de dialyse à équilibre rapide (RED). Ils ont été développés en étroite association avec l’industrie pharmaceutique pour effectuer des dosages de liaison des protéines plasmatiques, étape essentielle du développement de médicament.

Le dispositif RED compétitif a été mis au point en collaboration avec les laboratoires pharmaceutiques pour modéliser plus précisément les interactions médicamenteuses in vivo en permettant de réaliser des expériences de dialyse à équilibre dans un format multiplexé faisant intervenir la compétition pour les liaisons de différents tissus. Le dispositif RED est un appareil permettant d’effectuer des expériences de dialyse à l’équilibre dans un format compatible avec l’automatisation à haut débit, et se compose d’inserts jetables et d’une plaque de base formatée selon un format de microplaque standard.

Le dispositif RED compétitif se compose d’inserts jetables pour tubes de dialyse et d’une plaque de base réutilisable en PTFE de haute qualité. La plaque de base est très semblable à celle de notre dispositif RED standard, excepté qu’elle se divise en cuves (puits) de différentes tailles destinées à accueillir 2 à 8 inserts du dispositif RED par puits. Le format permet la réalisation d’expériences de dialyse compétitive impliquant 2 à 15 échantillons distincts de liquides de tissus ou de protéines.

Chaque insert RED compétitif contient une ou deux cuves séparées (chaque pack regroupe une sélection des deux types). Le dispositif RED compétitif n’exige aucune étape intensive d’assemblage ni équipement spécialisé, et chaque cuve/puits est facilement accessible depuis le haut du dispositif. Le dispositif RED compétitif accroît le pouvoir de la dialyse à équilibre en facilitant l’analyse des interactions médicamenteuses simultanées et la répartition entre des tissus multiples.

Caractéristiques du dispositif de dialyse à équilibre rapide (RED) compétitifs :
• Facile à utiliser : les tubes jetables n’ont pas besoin d’être pré-trempés, ni assemblés, ni d’équipement spécialisé
• Durée d’incubation réduite : la conception du dispositif offre un rapport surface-volume élevé entre la membrane et l’échantillon, ce qui permet d’atteindre l’équilibre en l’espace de 2 à 4 heures
• Format flexible : la plaque de base contient plusieurs cuves de tailles différentes qui permettent de réaliser des études sur la répartition des petites molécules faisant intervenir 2 à 16 échantillons de tissus ou de protéines, sans gaspillage
• Solide : la conception à compartiments élimine le risque de liaisons non spécifiques ou de fuite
• Reproductible et précis : réalisez des expériences contrôlées avec plusieurs tissus afin d’obtenir des résultats d’analyse ayant une forte prévisibilité pour les études in vivo avec des modèles animaux
• Qualité garantie : la plaque de base est composée de PTFE de haute qualité chimiquement inerte, ce qui élimine les liaisons non spécifiques et le risque de contamination ; le fonctionnement de chaque lot est testé dans un dosage de liaison des protéines pour des performances garanties

Applications :
• Études ADME-Tox : analyse in vitro de la répartition des médicaments entre le plasma et plusieurs tissus avant les études in vivo avec des modèles animaux
• Aide à déterminer la formulation de la posologie des médicaments pour les études in vivo
• Études des interactions entre médicaments
• Détermination de la liaison compétitive et de la constante de dissociation pour les petites molécules par rapport à plusieurs cibles

La détermination de l’étendue de la répartition d’une molécule entre le plasma et les tissus spécifiques de l’organisme est une phase critique du développement du médicament, car elle détermine le dosage des composés, leur efficacité, le taux de dégagement et le potentiel d’interactions médicamenteuses et de lésions tissulaires. Bien que l’évaluation finale de ces variables passe systématiquement par un dosage animal et une analyse, les systèmes d’analyse in vitro qui sont rapides et présentent une bonne prévisibilité sont vivement recommandés pour les études ADME-Tox.

La dialyse à équilibre fait partie des méthodes d’analyse in vitro les plus performantes pour l’évaluation de la liaison des médicaments et les exigences en matière de dosage. La dialyse à équilibre permet d’estimer la fraction non liée de médicaments dans le plasma ou la répartition des médicaments entre globules rouges et plasma, le plasma et les microsomes du foie ou le plasma et les broyats. Toutefois, de nombreuses études sur la répartition dans les tissus indiquent que certains médicaments montrent une forte liaison aux tissus testés un par un, mais qu’ils ont des préférences de liaison différentes lorsqu’ils sont en concurrence entre plusieurs tissus.

Caractéristiques des inserts du dispositif RED :
Chaque insert jetable à usage unique se compose de deux cuves côte à côte séparées par un cylindre vertical de membrane de dialyse (seuil de rétention des molécules de 8 000 ou 12 000) validée pour sa capacité de liaison non spécifique minimale. Ce format n’exige aucune étape intensive d’assemblage ni équipement spécialisé, et chaque cuve ou puits est facilement accessible depuis le haut de l’insert, une fois introduit dans le socle. En outre, le rapport élevé surface-volume du compartiment de la membrane permet des opérations de dialyse rapides, l’équilibre pouvant être atteint en quatre heures, avec des niveaux élevés de reproductibilité et de précision. Dans de nombreux cas, les expériences peuvent durer moins de 100 minutes.

• Jetable : ne nécessite aucune préparation, assemblage ou équipement spécialisé
• Durée d’incubation réduite : la large surface de dialyse accélère l’équilibre
• Membrane avec seuil de rétention des molécules de 8 K : seuil de rétention des molécules idéal pour les études de liaison entre protéines et médicaments
• Membrane avec seuil de rétention des molécules de 12 K également disponible pour des molécules de médicament plus grandes
• Composition de la membrane : cellulose régénérée avec une faible quantité de glycérol en guise d’humectant

Caractéristiques des plaques de base du dispositif RED :
Les inserts du dispositif RED sont conçus pour être utilisés avec les bases réutilisables en PTFE ou les plaques de base jetables en polypropylène à haute densité. Chaque plaque de base du dispositif RED accueille jusqu’à 48 inserts et présente l’encombrement d’une plaque à 96 puits standard, avec un espacement de 9 x 9 mm entre les puits, ce qui la rend compatible avec les systèmes de manipulation de liquides automatisés. En outre, les plaques de base jetables du dispositif RED sont disponibles pré-chargées, ce qui est pratique pour les scientifiques utilisant des applications de liaison des protéines. Les inserts de membrane n’ont pas besoin d’être pré-conditionnés. Si des matières radioactives sont employées, ce socle à usage unique se jette facilement afin d’éviter toute contamination et opération de nettoyage.