Thermo Scientific™ PvuII (10 U/μL)

Description

ADN Lambda digéré avec PvuIl, 0,7 % d’agarose, 15 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...C A G▵C T G...3'

3'...G T C▵G A C...5'

Conditions pour une activité à 100 %

• Tampon G 1X : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl₂ 10 mM, NaCl 50 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage

• PvuII est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et clivage

• Après une digestion en excès de 10 fois avec PvuII, plus de 90 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés, et plus de 95 % de ces derniers peuvent être recoupés

Effets de méthylation

• Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
• v
• CpG : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoBI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

Une digestion en excès supérieure à 15 fois avec Pvull peut induire une activité Star.