Thermo Scientific™ EZ-Link™ Phosphine-PEG3-Biotin

Description

La phosphine-PEG3-biotine Pierce Thermo Scientific™ est un réactif de biotinylation pour le marquage des molécules contenant de l’azoture, qui permet la détection basée sur la biotine et la purification par affinité des molécules via des stratégies de ligature Staudinger.

Le groupe phosphine réagit avec un azoture pour produire un intermédiaire aza-ylide piégé pour former une liaison amide stable et covalente, également appelée réaction de Staudinger. Le groupe azoture, qui est la cible réactive de la biotine activée par la phosphine, peut être introduit dans des protéines ou d’autres cibles cellulaires via des réactifs azotures ou par un marquage in vivo avec des dérivés azoture de blocs de construction métaboliques naturels. Comme ni les phosphines ni les azotures ne sont présents dans les systèmes biologiques, ils comprennent des paires de ligature chimiosélective (mutuellement spécifiques) pour le marquage et la conjugaison. Ainsi, lorsqu’elle est utilisée en association avec des stratégies de marquage des azotures, la phosphine-PEG₃-Biotine permet un marquage dirigé de la biotine pour faciliter la détection ou la purification par affinité des interactions protéiques et des modifications post-translationnelles à l’aide de sondes de streptavidine ou de résines d’agarose de streptavidine.

Points clés :

• Soluble se dissout facilement dans des solvants miscibles à l’eau (par exemple, DMSO) pour une dilution ultérieure dans des mélanges de réactions aqueuses avec des lysats cellulaires et d’autres échantillons biologiques

• Compatible la chimie de la réaction se produit efficacement dans des conditions de tampon simples ; ne nécessite aucun réactif accessoire tel que le cuivre ou les agents réducteurs

• Chimiosélectivité le groupe réactif de la phosphine est spécifique dans les échantillons biologiques pour les molécules “taguées” par un azoture, garantissant que la biotinylation est spécifique

• Espaceur de PEG le bras espaceur de polyéthylèneglycol aide à maintenir la solubilité des molécules marquées et diminue l’encombrement stérique pour la liaison par affinité avec l’avidine, la streptavidine ou la protéine NeutrAvidin