Molecular Probes™ pHrodo™ Red and Green Epidermal Growth Factor (EGF) and pHrodo™ Red Transferrin Conjugates

Description

Détectez l’EGF ou la transferrine internalisé(e) avec des conjugués de facteur de croissance épidermique (EGF) pHrodo Red et pHrodo Green hautement actifs et sensibles au pH ainsi que le conjugué de transferrine pHrodo Red. Ces conjugués sont composés de colorants pHrodo directement liés à des molécules d’EGF ou de transferrine hautement actives, qui peuvent être utilisées dans des applications telles que HCS, cytométrie en flux, fluorométrie sur microplaques et HTS pour mesurer les molécules d’EGF et de transferrine internalisées. Les colorants pHrodo Red et pHrodo Green sont fortement fluorescents lors d’une exposition à des environnements acides, tels que ceux trouvés dans les endosomes et lysosomes.

Les conjugués du facteur de croissance épidermique (EGF) pHrodo Red et pHrodo Green sont composés de colorant pHrodo Red ou pHrodo Green directement conjugué à une molécule EGF recombinante humaine hautement active et sont utilisés pour la détection du récepteur EGF internalisé dans les cellules. L’EGF marqué par fluorescence a permis aux scientifiques d’étudier les interactions récepteur-membrane, de déterminer la distribution des récepteurs, de calculer les constantes de vitesse pour l’interaction de l’EGF avec son récepteur, et bien plus encore. Les marquages fluorescents qui répondent à un changement de pH font passer la détection à un autre niveau.

Le conjugué de transferrine pHrodo Red se compose d’un colorant pHrodo Red directement conjugué à une molécule de transferrine hautement active et est utilisé pour la détection de la transferrine internalisée dans les cellules. La transferrine est une glycoprotéine sérique monomérique (∼80 000 daltons) qui se lie à un récepteur spécifique à la surface des cellules des vertébrés et délivre jusqu’à deux atomes de Fe3+ grâce à une endocytose médiée par le récepteur. Une fois que les protéines de la transferrine porteuses de fer sont à l’intérieur des endosomes, l’environnement acide favorise la dissociation du fer à partir du complexe récepteur de la transferrine. Après la libération du fer, l’apotransferrine est recyclée dans la membrane plasmique, où elle est libérée de son récepteur pour éliminer plus de fer.

Les colorants pHrodo Red et pHrodo Green hautement photostables sont faiblement fluorescents à l’extérieur des cellules à un pH neutre, mais lorsqu’ils sont internalisés spécifiquement par l’EGF ou l’endocytose de la transferrine, ils deviennent fortement fluorescents dans les endosomes acides. Cela permet de mesurer l’EGF ou la transferrine internalisé(e) ainsi que le suivi dynamique de l’internalisation de l’EGF ou de la transferrine dans les cellules vivantes.

Le conjugué d’EGF pHrodo Red et le conjugué de transferrine pHrodo Red présentent des spectres d’excitation/émission de 560/585 nm et peuvent être multiplexés avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, rouges et rouge profond, tels que Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP et Mitotracker Deep Red, entre autres. Le conjugué d’EGF pHrodo Green présente des spectres d’excitation/émission de 509/533 nm et peuvent être multiplexés avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, rouges et rouge profond, tels que Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP et Mitotracker Deep Red, entre autres.

Les conjugués d’EGF pHrodo Red et pHrodo Green et le conjugué de transferrine pHrodo Red sont compatibles avec les applications telles que la microscopie par fluorescence traditionnelle, l’analyse à haute densité (HCS), la cytométrie en flux et la fluorimétrie basée sur microplaques ou le criblage à haut débit (HTS). Les conjugués sont également compatibles avec les microscopes par fluorescence grand champ ou confocale, les cytomètres en flux, les lecteurs de plaques de fluorescence et les instruments à haute densité.