Invitrogen™ Dextrane pHrodo™ Red et Green, 10 000 MW, pour l’endocytose

Description

Réalisez une imagerie à cellules vivantes de l’endocytose plus rapidement et avec plus de précision, sans avoir besoin d’étapes de lavage ou de colorant extincteur avec les conjugués de dextrane pHrodo Red et Green de 10 000 MW. Les conjugués de dextrane pHrodo Red et Green sensibles au pH ne sont pas fluorescents dans des environnements neutres, mais provoquent un signal fluorescent rouge ou vert vif dans les plages de pH comprises entre 5 et 8, comme ceux des endosomes et des lysosomes. Ces dextranes marqués au pHrodo peuvent être multiplexés avec d’autres colorants et utilisés dans les applications d’imagerie, de HTS, de traçage et de flux.

Le dextrane pHrodo Red (réf. catalogue P10361) est une meilleure alternative aux autres conjugués fluorescents de dextrane (comme la BCECF et la tétraméthylrhodamine [TRITC]) pour l’imagerie de l’endocytose des cellules vivantes, le procédé selon lequel la membrane plasmique bourgeonne pour former des vésicules liées à la membrane (endosomes), qui sont ensuite acheminés vers diverses destinations dans la cellule. Le dextrane pHrodo Red possède des spectres d’émission/excitation de fluorescence sensible au pH de 560/585 nm et son émission de fluorescence augmente en intensité avec l’augmentation de l’acidité. Cette augmentation est particulièrement considérable dans la plage de pH 5–8, comme fréquemment observé dans les vésicules endocytaires. Le dextrane pHrodo Red est essentiellement foncée dans l’environnement extracellulaire ; cependant, lors de l’internisation, le conjugué de dextrane provoque un signal fluorescent rouge vif dans l’environnement acide des endosomes. Le dextrane pHrodo Red peut également être multiplexée avec une grande variété de colorants et de rapporteurs bleus, verts et rouge profond, tels que GFP, Fluo-4, calcéine, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 Green, Mitosox Green et Mitotracker Deep Red, entre autres.

Le dextrane pHrodo Green (réf. catalogue P35368), tout comme le dextrane pHrodo Red, permet d’obtenir des résultats rapides et précis pour les tests d’endocytose et de phagocytose des cellules vivantes. Les conjugués de pHrodo Green ne sont pas fluorescents à l’extérieur de la cellule à un pH neutre, mais émettent une fluorescence vert vif dans les plages de pH acide, telles que celles des endosomes et des lysosomes. Le colorant pHrodo Green peut être multiplexé avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, rouges et rouge profond tels que Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RPF et Mitotracker Deep Red, entre autres. Le conjugué de dextrane pHrodo Green de 10 000 MW peut être utilisé dans l’imagerie cellulaire, l’analyse à haute densité, le criblage à haut débit et les applications de flux. Pour une sélection plus large de colorants compatibles, reportez-vous à l’outil de coloration cellulaire ou au SpectraViewer.

Principales applications utilisant des dextranes marqués :
il existe de nombreuses citations décrivant l’utilisation de dextranes marqués. Certaines des utilisations les plus courantes incluent :
• Traçage neuronal (antérograde et rétrograde) dans les cellules vivantes
• Traçage de lignées cellulaires dans les cellules vivantes
• Traçage neuroanatomique
• Examen des communications intercellulaires (par ex., dans les jonctions lacunaires, pendant la cicatrisation des plaies, et pendant le développement embryonnaire)
• Étude de la perméabilité vasculaire et de l’intégrité de la barrière hémato-encéphalique
• Suivi de l’endocytose
• Surveillance de l’acidification (certains conjugués de colorant-dextrane sont sensibles au pH)
• Étude des propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique.

Normes de fabrication strictes
Nous offrons plus de 50 conjugués de dextranes fluorescents et biotinylés dans plusieurs plages de poids moléculaire. Les dextranes sont des polysaccharides hydrophiles caractérisés par leur poids moléculaire de modéré à élevé, une bonne hydrosolubilité et une faible toxicité. Ils présentent également une faible immunogénicité. Les dextranes sont biologiquement inertes en raison de leurs liaisons poly-(α-D-1,6-glucose) peu communes, qui les rendent résistantes au clivage par la plupart des glycosidases cellulaires endogènes.

Dans la plupart des cas, nos dextranes fluorescents sont bien plus vifs et ont une charge négative plus élevée que les dextranes disponibles auprès d’autres sources. De plus, nous utilisons des méthodes rigoureuses pour éliminer autant de colorant non conjugué qu’il est pratique, puis nous effectuons un dosage de nos conjugués de dextranes par chromatographie sur couche mince afin d’aider à garantir l’absence de contaminants à faible poids moléculaire.

Un large choix de substituants et de poids moléculaires
Nos dextranes sont conjugués à la biotine ou à une grande variété de fluorophores, dont sept de nos colorants Alexa Fluor et sont disponibles dans ces poids moléculaires (MW) nominaux : 3 000 ; 10 000 ; 40 000 ; 70 000 ; 500 000 ; et 2 000 000 daltons.