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OPTIZYME™ SphI (PaeI), Fisher BioReagents™

Marque:  Fisher BioReagents BP8029-1

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Description

Description

5’…G C A T G^C...3’
3’…C^G T A C G...5’

Fourni avec : Tampon OPTIZYME 10X1
Conditions pour 100 % d’activité :

  • 1Tampon X OPTIZYME 1 : 10 mM de tris-HCl (pH 7,5 à 37°C), 10 mM de MgCl2 et 0,1 mg/ml de BSA
  • Laissez incuber à 37°C
Activité enzymatique dans les tampons OPTIZYME :
  • Tampon 1 : 100 %
  • Tampon 2 : 50 - 100 %
  • Tampon 3 : 0 - 20 %
  • Tampon 4 : 50 - 100 %
  • Tampon 5 : 0 - 20 %
Tampon de stockage :
  • 10mM de phosphate de potassium (pH 7,0 à 25°C), 50 mM de KCl, 1 mM de DTT, 0,1 mM d’EDTA, 0,15 % de Triton X-100, 0,5 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol.
Ligature et nouveau clivage :
  • Plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive 50 fois avec SphI.
  • Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
  • Un minimum de 5 unités de SphI est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.
  • Extrémités compatibles : Hin1II, XceI
  • Effets de méthylation :
  • Dam : Ne se chevauche jamais - aucun effet
  • Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
  • CpG : Possibilité de chevauchement - aucun effet.
    • 5’…m5C GCATGm5C G...3’
  • 3’… Gm5CGTAC Gm5C...5’
  • (Aucun effet sur le clivage)
  • EcoKI : Ne se chevauche jamais - aucun effet
  • EcoBI : Risque de chevauchement - bloqué
    • 5’…TGm6A(N)5GCA TGCT...3’
  • 3’…AC T(N)5CGTm6ACGA...5’
  • (Le clivage est bloqué)

TRUSTED_SUSTAINABILITY
Spécification

Spécification

10 U/μl
37°C
> 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive multipliée par 50 avec Sphl
500 U
SphI
10X OPTIZYME™ Buffer 1
7.4
10mM Potassium Phosphate (pH 7 at 25°C), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 0.15% Triton™ X-100, 0.5mg/mL BSA, 50% Glycerol
GCATG.C
Liquide
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