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OPTIZYME™ AarI, Fisher BioReagents™
Marque: Fisher BioReagents BP8069-1
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Description
5’...C A C C T G C (N)4 ^...3’
3’...G T G G A C G (N)8 ^...5’
Fourni avec : Tampon OPTIZYME 10X Aarl, ScaI, PasI et oligonucléotide 50X
Conditions pour 100 % d’activité :
- 1Tampon OPTIZYME X Aarl, ScaI, PasI : 10 mM de bis-tris propane-HCl (pH 6,5 à 37°C), 10 mM de MgCl2, 100 mM de KCI, 0,1 mg/ml de BSA
- Tampon 1 : Aucune réaction (+oligonucléotide)
- 10mM de phosphate de potassium(pH 7,4 à 25°C), 100 mM de KCl, 1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol.
- Au moins deux copies de sa séquence de reconnaissance sont nécessaires pour le clivage avec AarI
- 0,5 μM d’oligonucléotide améliore le clivage des ADN, en particulier ceux qui ont un seul site AarI.
- Une surdigestion avec Aarl supérieure à 10 fois peut induire une activité Star.
- AarI peut rester associée à l’ADN clivé. Cela peut provoquer un décalage de la bande d’ADN pendant l’électrophorèse. Pour éviter de voir des bandes d’ADN atypiques, utiliser le colorant de charge d’ADN 6X et une solution SDS pour la préparation des échantillons, ou chauffer l’ADN digéré en présence de SDS avant l’électrophorèse.
Effets de méthylation :
Dam : Ne se chevauche jamais - aucun effet
Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
CpG : Risque de chevauchement - altération du clivage
- 5’...CACCTGm5C G...3’
Spécification
| 2 U / μl | |
| 37°C | |
| > 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive multipliée par 10 avec Aarl | |
| Garder le récipient hermétiquement fermé | |
| CACCTGC | |
| Liquide |
| 25 à 50 % d’eau, > 50 % de glycérine | |
| 7.4 | |
| 10mM Potassium Phosphate (pH 7.4 at 25°C), 100mM KCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.2mg/mL BSA, 50% Glycerol | |
| 125 U | |
| Aarl |