Thermo Scientific™ NotI (10 U/μl)

Description

ADN Ad2 digéré avec Notl, 0,7 % d’agarose, 7 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'..G C▵G G C C G C...3'

3'..C G C C G G▵C G...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon O 1X : Tris-HCl 50 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl₂ 10 mM, NaCl 100 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• Notl est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 20 mM (pH 7,8 à 25°C), NaCl 100 mM, EDTA 0,1 mM, DTT 1 mM, Triton X-100 0,02 %, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec NotI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
• v
• CpG : chevauchement complet ; blocage
• EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoBI : ne se chevauche jamais —aucun effet

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN d’adénovirus-2 intégré à de l’agarose en 16 heures

Extrémités compatibles :

• Bsp120I, CfrI, Eco52I

Remarque :

Dosé à l’aide de l’ADN plasmide pTZ19RJL2 digéré avec BseLI. Les plasmides superenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de Notl pour une digestion complète que les ADN linéaires.