Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μl)

Description

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5’...C▵C A T G G...3’

3’...G G T A C▵C...5’

Conditions pour une activité de 100 % :

• Tampon 1X Tango : 33 mM de Tris-acétate (pH 7,9 à 37°C), 10 mM de Mg-acétate, 66 mM de K-acétate et 0,1 mg/ml de BSA
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• NcoI est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,5 à 25°C), 50 mM de KCl, 1 mM de DTT, 0,1 mM d’EDTA, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol

Ligature et clivage :

• Après une surdigestion 50 fois supérieure avec NcoI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés.

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais aucun effet.Dam : ne se chevauche jamais aucun effet.
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• CpG : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• EcoKI : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• EcoBI : ne se chevauche jamais — aucun effet.

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.

Extrémités compatibles :

• AflIII, PscI, BtgI, Eco130I, FatI, PagI

Remarque :

Une faible concentration en sels, une forte concentration en glycérol (>5 %), un pH >8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star.