Molecular Probes™ FluxOR™ Potassium Ion Channel Assay

Description

• Spécifique au canal K⁺—mesurez le flux ionique dans les canaux potassiques dépendants de la tension et du ligand
• Rapide—effectuez des cribles en mode haut débit avec des résultats reproductibles et un excellent rapport signal/bruit sans colorant d’extinction
• Pharmacologiquement pertinent—les bloqueurs connus présentent une inhibition dose-dépendante dans une grande fenêtre de signal

Le test des canaux ioniques de potassium FluxOR™ est un essai homogène optique permettant de mesurer l’activité des canaux ioniques de potassium et des transporteurs par criblage à haut débit (HTS). L’essai homogène est basé sur la perméabilité des canaux de potassium au thallium I. Lorsque les canaux de potassium sont ouverts par un stimulus, l’influx de thallium provenant du milieu externe est détecté avec un colorant indicateur très sensible. Le signal fluorogène reflète quantitativement l’activité des canaux ioniques et des transporteurs qui sont perméables au thallium, y compris hERG, Kir2.1 et d’autres canaux potassiques pharmacologiquement importants. La fluorescence rapportée dans le système FluxOR™ devient donc un indicateur d’activité de substitution pour tout canal ionique ou transporteur perméable au thallium.

Le dosage FluxOR™ des canaux ioniques de potassium permet un criblage rapide et robuste à haut débit (HTS) des cibles des canaux potassiques dans une nouvelle mesure d’équilibre, donnant de manière reproductible des valeurs IC₅₀ prédictives de bloc ou de modulation dans des plates-formes à faible débit. Le colorant FluxOR™ est suffisamment sensible pour garantir des signaux importants en mode haut débit à de faibles concentrations (mM) de thallium extracellulaire. Pour la plupart des applications, le colorant FluxOR™ est dissous dans un tampon HBSS physiologique pour le chargement dans les cellules, assisté par notre formulation exclusive Powerload™ (Réf cat. P10020).

Le dosage FluxOR™ des canaux ioniques de potassium fournit une solution concentrée de thallium et tous les tampons nécessaires, permettant une flexibilité maximale de la cible et une facilité d’utilisation dans un format homogène qui a été démontré pour une utilisation avec des cellules exprimant hERG de manière stable, ainsi que notre livraison et expression BacMam-hERG réactif (Réf cat. B10019 et B10033). L’ADNc de canal de potassium hERG produit dans le système de distribution et d’expression Invitrogen BacMam peut être utilisé en option avec ce kit. L’association d’un colorant de capteur de potassium fluorescent de couleur vive exclusif et du gène de canal de potassium hERG transféré par le système BacMam confère une excellente flexibilité lors de la préparation du test et une sensibilité supérieure en matière de détection de l’activité des canaux de potassium dans des systèmes biologiquement pertinents dans des conditions physiologiques, sans qu’il soit nécessaire de recourir à des extincteurs.