Thermo Scientific™ Kit de synthèse d’ADNc monocaténaire RevertAid

Description

Le kit RevertAid de synthèse d’ADNc premier brin est un système complet permettant une synthèse efficace de l’ADNc premier brin issu de modèles d’ARN. Le kit convient à la synthèse d’ADNc jusqu’à 13 kb. L’inhibiteur d’ARNase RiboLock fourni avec le kit protège efficacement les modèles d’ARN de la dégradation.

Le kit RevertAid de synthèse d’ADNc premier brin est fourni avec l’amorce oligo(dT)₁₈ ainsi que les amorces hexamères aléatoires. L’amorce oligo(dT)₁₈ hybride de façon sélective sur la queue poly(A) de l’ARNm. Les amorces hexamères aléatoires ne nécessitent pas la présence de la queue poly(A) ; par conséquent, elles peuvent être utilisées pour la transcription de régions à extrémité de 5’ de synthèse d’ARNm ou ADNc d’espèces d’ARN privées de queue poly(A) (par exemple, les micro-ARN). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent aussi être utilisées avec le kit.

Ce kit utilise la transcriptase inverse RevertAid présentant une activité RNase H plus faible par rapport à la transcriptase inverse d'AMV. L'inhibiteur RNase RiboLock recombinant, fourni avec le kit, protège efficacement le modèle d'ARN de la dégradation. Totalement compatible avec la réaction de transcription inverse, puisqu’il maintient l’activité à des températures allant jusqu’à 55°C. L’oligo(dT)₁₈ se lie par annelage, de manière sélective, à queue poly(A) de l’ARNm. Les amorces hexamères aléatoires ne nécessitent pas la présence de poly(A). En conséquence, elles peuvent être utilisées pour la transcription des régions des extrémités 5’ de l’ARNm ou la synthèse d’ADNc en utilisant l’ARN sans queue poly(A) (par exemple, les micro-ARN). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent aussi être utilisées avec les kits. Le premier brin de l'ADNc peut directement être utilisé à titre de modèle dans la PCR (voir le protocole RT-PCR), la PCR en temps réel ou dans la synthèse de l'ADNc deuxième brin (voir le protocole).

• ADNc premier brin pleine longueur jusqu’à 13 kb
• Températures de réaction augmentées comprises entre 42 et 50°C
• Fourni avec l’inhibiteur recombinant d’ARNase RiboLock
• Amorce —oligo(dT)₁₈ et amorces hexamères aléatoires incluses avec le kit

Recommandées dans les cas suivants :

Synthèse d’ADNc premier brin pour la RT-PCR et la RT-PCR en temps réel (1, 2) ; Construction de banques d’ADNc pleine longueur ; Génération de sondes pour l’hybridation ; Synthèse de l’ARN antisens.