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Thermo Scientific™ PvuI (10 U/μl)
L’enzyme de restriction PvuI reconnaît les sites CGAT^CG, et sa coupe est optimale à 37°C dans le tampon R (isoschizomères : BpvUI, MvrI, Ple19I).
Marque: Thermo Scientific™ ER0621
Description
ADN Lambda digéré avec PvuI, 0,7 % d’agarose, 3 sites de clivage
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
5'..C G A T▵C G...3'
3'..G C▵T A G C...5'
Conditions pour une activité à 100 %
- Tampon R 1X : Tris-HCl 10 mM (pH 8,5 à 37°C), MgCl 2 10 mM, KCl 100 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage
- PvuI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl 300 mM, EDTA 0,1 mM, DTT 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Ligature et clivage
- Après une digestion en excès de 50 fois avec PvuI, plus de 90 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et plus de 95 % d’entre eux peuvent être recoupés
Effets de méthylation
- Dam : chevauchement complet ; aucun effet
- v
- CpG : chevauchement complet ; blocage
- EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
- EcoBI : ne se chevauche jamais —aucun effet
Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose
- Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures
Extrémités compatibles
- Bsp119I, Bsu15I, Hin1I, Hin6I, HpaII, MaeII, MspI, NarI, Psp1406I, SsiI, XmiI
Spécification
10 U/μl | |
PvuI | |
Oui | |
Non | |
Enzyme de restriction |
Sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm | |
Tampon 10X R | |
37°C | |
300 U | |
Clonage traditionnel |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.