Thermo Scientific™ PscI (PciI) (10 U/μl)

Description

ADN Lambda digéré avec PscI (PciI), 0,7 % d’agarose, 2 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...A▵C A T G T...3'

3'...T G T A C▵A...5'

Conditions pour une activité à 100 %

• Tampon Tango 1X : Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37°C), Mg-acétate 10 mM, K-acétate 66 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage

• PscI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM , BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et clivage

• Après une digestion en excès de 50 fois avec PscI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation

• Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
• v
• CpG : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoKI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé
• EcoBI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Extrémités compatibles

• AflIII, BtgI, Eco130I, FatI, NcoI, PagI

Remarque :

PscI, comme ses isoschizomères BspLU11I et PciI, est inhibée par les détergents non ioniques Triton X-100 (> 0,002 %) et Nonidet P40 (> 0,001 %).