Thermo Scientific™ LweI (SfaNI) (10 U/μL)

Description

ADN Lambda digéré avec LweI (SfaNI), 1,4 % d’agarose, 169 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'..G C A T C (N)₅▵...3'

3'..C G T A G (N)₉▵...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon Tango™ 1X : Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37°C), Mg-acétate 10 mM, K-acétate 66 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• LweI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
• v
• CpG : possibilité de chevauchement —clivage affecté
• EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoBI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé

Remarque :

La Lwel peut rester associée à l’ADN clivé. Cela peut provoquer un décalage de la bande d’ADN pendant l’électrophorèse. Pour éviter de voir des bandes d’ADN atypiques, utilisez le colorant de charge d’ADN 6X et une solution SDS pour la préparation des échantillons, ou chauffez l’ADN digéré en présence de SDS avant l’électrophorèse. Au moins deux copies du site de reconnaissance de la LweI sont nécessaires pour un clivage efficace.