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Thermo Scientific™ HphI (10 U/μL)
L’enzyme de restriction HphI reconnaît les sites GGTGA(8/7)^, et sa coupe est optimale à 37°C dans le tampon B (isoschizomères : AsuHPI).
Marque: Thermo Scientific™ ER1102
Description
ADN Lambda (dam-) digéré avec HphI, 1,4 % d’agarose, 168 sites de clivage
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
5'...G G T G A (N)8▵...3'
3'...C C A C T (N)7▵...5'
Conditions pour une activité à 100 % :
- Tampon B 1X : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl2 10 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage :
- HphI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl 50 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Effets de méthylation :
- Dam : possibilité de chevauchement ; blocage
- Dcm : possibilité de chevauchement ; aucun effet
- CpG : possibilité de chevauchement —aucun effet
- EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
- EcoBI : possibilité de chevauchement —blocage
Remarque :
Dosé à l’aide d’ADN Lambda (dam) (#SD0021). Hphl est bloquée par le chevauchement avec la méthylation dam. Pour éviter la méthylation dam, utilisez une souche dam-, dcm telle que GM2163 (#M0099). Une forte concentration en glycérol (> 5 %), un pH > 8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star.
Spécification
10 U/μl | |
HphI | |
Oui | |
Oui | |
Enzyme de restriction |
Sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dcm | |
Tampon 10X B | |
37°C | |
1500 U | |
Clonage transparent |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.