Thermo Scientific™ Esp3I (BsmBI) (10 U/μl)

Description

ADN Lambda digéré avec Esp3I (BsmBI), 1 % d’agarose, 14 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...C G T C T C (N)₁▵...3'

3'...G C A G A G (N)₅▵...5' Conditions pour une activité à 100 % :

• [Tampon Tango 1X] + DTT : [Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37°C), Mg-acétate 10 mM, K-acétate 66 mM et BSA 0,1 mg/ml] + DTT 1,0 mm
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• Esp3I est fournie sous la forme suivante : Phosphate de potassium 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl 100 mM, EDTA 1 mM, DTT 1 mM, BSA 0,5 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec Esp3I, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• Dcm : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• CpG : chevauchement complet ; blocage
• EcoKI : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• EcoBI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 U de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

L’enzyme nécessite le DTT. Le DTT fraîchement fabriqué doit être ajouté au tampon de réaction. Esp3I clive en aval de son site de reconnaissance et peut générer n’importe quel excédant 5’ de base 4 souhaité. Cette fonctionnalité est utile pour le clonage de produits de PCR.