Thermo Scientific™ Eam1104I (EarI) (10 U/μL)

Description

ADN Lambda digéré avec Eam1104I (EarI), 1 % d’agarose, 34 sites de clivage

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...C T C T T C (N)₁▵...3'

3'...G A G A A G (N)₄▵...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon Tango™ 1X :
• Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37 C), Mg-acétate 10 mM, K-acétate 66 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• Eam1104I est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion avec Eam1104I en excès de 50X, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet
• CpG : possibilité de chevauchement ; aucun effet
• EcoKI : ne se chevauche jamais ; aucun effet

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

Certains sites dans l’ADN Lambda sont difficiles à cliver avec Eam1104I, tout comme avec son prototype Ksp632I.