Thermo Scientific™ Cfr9I (XmaI) (10 U/μl)

Description

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...C▵C C G G G...3'

3'...G G G C C▵C...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon 1X Cfr9I : Tris-HCl 10 mM (pH 7,2 à 37°C), MgCl₂ 5 mM, glutamate de sodium 200 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• Cfr9I est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl, 250 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec Cfr9I, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• Dcm : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• CpG : se chevauche complètement - clivage affecté
• EcoKI : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• EcoBI : ne se chevauche jamais ; aucun effet

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 U de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

Pour réaliser la digestion complète du substrat avec Cfr9I, la concentration d’ADN ne doit pas être inférieure à 50 μg/ml dans le tampon de réaction.