Thermo Scientific™ BpiI (BbsI) (10 U/μl)

Description

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5'...G A A G A C (N)₂▵...3'

3'...C T T C T G (N)₆▵...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon G 1X
• Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl₂ 10 mM, NaCl 50 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• BpiI est fournie sous la forme suivante :
• Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec Bpil, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet
• CpG : possibilité de chevauchement ; aucun effet
• EcoKI : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• EcoBI : possibilité de chevauchement — effet non déterminé

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

BpiI clive en aval de son site de reconnaissance et peut générer n’importe quelle saillie de 5’ de base 4 souhaité. Cette fonctionnalité est utile pour le clonage direct de produits de PCR.