IBA Lifesciences Kit MB d’isolement Fab Streptamer™ pour CD3+ CD45RO+ Tcm

Description

• Microbilles magnétiques Strep-Tactin™ pour Fab Streptamers™ ; 4 flacons de 5 x 10⁸ cellules chacun
• Fab-Strep pour CD3, isolement des cellules T humaines ; 1 flacon de 1 x 10⁹ cellules
• Fab-Strep pour CD45 RO, isolement des cellules T humaines ; 3 flacons de 2 x 10⁸ cellules
• Solution mère de biotine pour la technologie Streptamer™ ; 3 x 1 ml
• Tampon IS, tampon de lavage Streptamer™, 10 x concentré ; 2 x 50 ml
• L’isolement des cellules T humaines à mémoire centrale CD3+ CD45RO+ est effectué par double sélection positive en série. Dans une première étape, les PBMC sont marqués avec Fab Streptamers™ magnétiques pour CD3. Les cellules marquées sont isolées dans un aimant puissant (StrepMan, position horizontale) où elles migrent vers la paroi du tube du côté de l’aimant. Cette fraction de cellules positives CD3 est collectée et les cellules sont libérées de tous les réactifs de marquage par addition de biotine dans un aimant puissant (StrepMan, position verticale). Les Streptamers™ magnétiques migrent vers la paroi du tube et les cellules sans marquage restent dans le surnageant. La biotine est éliminée par lavage. Les cellules CD3 positives pures et sans marquage sont soumises à une deuxième sélection positive avec Fab Streptamers™ magnétiques pour CD45RO, en suivant la même procédure.
• La préparation cellulaire qui en résulte est fortement enrichie en cellules T à mémoire centrale CD3+ CD45RO+ d’une pureté supérieure à 90 %. Aucune colonne n’est nécessaire.