Molecular Probes™ Alexa Fluor™ 790 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Description

Alexa Fluor™ 790 est un colorant brillants et photostable proche de l’infrarouge qui est spectralement similaire au vert d’indocyanine (ICG) et au colorant IRDye™ 800. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 790 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. Invisible pour l’œil humain, la fluorescence de ce colorant Alexa Fluor™ à grande longueur d’onde peut être facilement détectée par la plupart des systèmes d’imagerie. En tant que colorant Alexa Fluor™ à la plus longue longueur d’onde, l’émission est bien séparée des fluorophores rouge lointain couramment utilisés, tels que le colorant Alexa Fluor™ 647 ou l’allophycocyanine (APC), facilitant ainsi l’analyse multicolore. Ce fluorophore devrait également être utile pour les applications d’imagerie in vivo chez les petits animaux (SAIVI) ou pour les applications Western à deux couleurs avec le système d’imagerie infrarouge LI-COR™ Odyssey™. En plus des formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 790 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection cellulaires. L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 790 est l’outil le plus populaire pour conjuguer ce colorant d'une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH₂) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ qui en résulte présente une plus grande fluorescence et une meilleure photostabilité que les conjugués d’autres fluorophores spectralement similaires.

Pour plus d’informations sur cet ester AlexaFluor™ NHS :

marquage du fluorophore : Colorant Alexa Fluor™ 790
Groupe de réactifs : Ester NHS
Réactivité : Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué : 784/814 nm
Coefficient d’extinction : 260 000 cm-1M-1
Colorants spectralement similaires : vert d’indocyanine (ICG) et colorant IRDye™ 800
Poids moléculaire : ∼ 1750

Réaction de conjugaison classique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.

L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.

Purification de conjugués
Les anticorps marqués sont généralement séparés du colorant Alexa Fluor™ libre à l’aide d’une colonne de filtration sur gel, telle que Sephadex™ G-25, Biogel™ P-30 ou équivalent. Pour des protéines beaucoup plus grandes ou plus petites, sélectionnez un milieu de filtration sur gel ayant un seuil de poids moléculaire approprié ou purifiez par dialyse. Nous proposons plusieurs kits de purification optimisés pour différentes quantités de conjugués d’anticorps :
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 0,5 à 1 mg (A33086)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 20 à 50 μg (A33087)
kit de purification de conjugués d’anticorps pour 50 à 100 μg (A33088)

En savoir plus sur le marquage des protéines et des anticorps
Nous offrons une large sélection de kits de marquage d’anticorps et de protéines de Molecular Probes™ pour convenir à votre produit de départ et à votre configuration expérimentale. Consultez nos kits de marquage d’anticorps ou utilisez notre outil de sélection de chimie de marquage pour d’autres choix. Pour en savoir plus sur nos kits de marquage, lisez Kits de marquage des protéines et des acides nucléiques, section 1.2 dans le manuel Molecular Probes™.

Nous vous préparerons un conjugué sur mesure
Si vous ne trouvez pas ce que vous cherchez dans notre catalogue en ligne, nous vous préparerons un conjugué d’anticorps ou de protéines sur mesure. Notre service de conjugaison personnalisé est efficace et confidentiel, et nous croyons en la qualité de notre travail. Nous sommes certifiés ISO 9001:2000.